Patricia De La Madrid Salmer 1 n

Apuntes

Patricia De La Madrid Salmer ó n Modificación genética 1 BLOQUE I: Transferencia génica a células animales en cultivo ¿Si se quiere introducir la construcción pMHC (músculo de cerdo)-reporter en una línea celular determinada que pasos habría que seguir? En primer lugar, habría que realizar la construcción; en el caso de que ya esté en bibliografía, habría que pedírsela al investigador y después subclonar. Pero, si no se encuentra, habría que fabricarla, para ello tendríamos que extraer el DNA de cualquier célula del cerdo (ya que todas las células tienen el mismo DNA, no es necesario que la célula sea muscular) y realizar una PCR para amplificar nuestra secuencia de interés. Posteriormente, tendríamos que transferir la construcción a la línea celular de interés, hacer integración y, finalmente, ver la expresión para comprobar que el experimento se ha realizado con éxito. Experimento inicial células bovinas mamarias En primer lugar, se debe proceder a la extracción/obtención de las células bovinas, el método más fácil es a través de la sangre. El siguiente paso consiste en genotipar. Es decir, las diferentes variantes existentes de las mismas se deben identificar mediante Southern B...