Técnicas moleculares: separación, análisis, anticuerpos y ADN recombinante

Apuntes

Si queremos separar una enzima de la mezcla, la matriz debe poseer el sustrato de esa enzima; si queremos separar un receptor, la matriz debe posee su ligando; si queremos separar un anticuerpo, la matriz debe poseer el antígeno y así sucesivamente. II. Electroforesis en Gel de Poliacrilamida (PAGE): En esta técnica se obliga a una mezcla de proteínas a migrar a través de una lámina de gel de poliacrilamida mediante la aplicación de una corriente eléctrica. Las diferentes proteínas quedan separadas en manchas llamadas bandas. Existen dos versiones principales del procedimiento. a) SDS-PAGE: la mezcla de proteínas es sometida primeramente al detergente iónico SDS y luego se la hace migrar a través del gel. El SDS desnaturaliza las proteínas y anula sus cargas de manera que solo el tamaño de las proteínas es la propiedad aprovechada para separarlas. Las proteínas más pequeñas son más rápidas y llegan más lejos en el gel que las más grandes. b) Electroforesis Bidimensional: En este caso el gel de poliacrilamida tiene un gradiente de pH y las proteínas migran en una dirección hasta alcanzar su punto isoeléctrico (pH en el que una proteína tiene carga neta cero y ya no migra) separándol...