Biología m

Apuntes

•Técnica de PCR y variantes La reacción en cadena de la polimerasa (PCR, por sus siglas en inglés: polymerase chain reaction) es una reacción enzimática in vitro que amplifica segmentos específicos de ADN mediante un proceso de desnaturalización, unión de cebadores y síntesis de ADN. Aprovecha las características de replicación del ADN y permite obtener múltiples copias de un fragmento en un tiempo reducido, similar a la replicación celular. La PCR es altamente específica, rápida y sensible, ideal para detectar cantidades mínimas de ADN y facilitar su identificación. •Componentes de la PCR Los componentes necesarios para realizar una PCR incluyen: ADN molde, que debe estar íntegro y libre de contaminantes, con una cantidad aproximada de 100 a 300 ng en muestras humanas; ADN polimerasa termoestable, que se obtiene de Thermus aquaticus y funciona a 72°C; cebadores o primers, secuencias cortas complementarias al ADN molde, diseñados en pares (forward y reverse) para delimitar el fragmento a amplificar, con concentraciones de 200 a 400 nM; desoxinucleótidos trifosfatados (dNTP), que la enzima incorpora en las cadenas en crecimiento, en concentraciones de 50 a 200 μM; cloruro de ma...