Practica 4

Apuntes

Practica 4 Principales fuentes de linfocitos de animales : Timo , bazo y ganglios linfaticos perifericos Principales fuentes de linfocitos en humanos: Mas comoda ( Sangre periferica ) , bazo , amigdalas , ganglios linfaticos ( Linfonodos ) Nota: • Las poblaciones celulares son diferentes (si se extrae de zonas diferentes) en madurez o proporcion relativa Separacion rapida de poblaciones linfocitarias: • S. en gradiente de densidad ( Mononucleares ) • S. de la sangre periferica en tubo ( Leucocitos totales ) / Sedimentacion espontanea • Formacion de rosetas ( Linfocitos T ) • S. en placa y procedimientos magneticos • Citometria de flujo Reactivos: • Ficoll Hipaque ◦ Ficoll 400 (9grs) , H2O d (115ml) , Hipaque 50% ( 30ml ) • PBS ( Sol. Salina a mortiguadora con fosfatos ) / PH 7.4 con Hcl 6N ◦ NaCl ( 17grs ) , Fosfato dibasico de Sodio 7 H2O ( 2.35grs ) , Fosfato monobasico de sodio (0.45grs) , H2O d (2LT) • Azul de tripan (1% acuoso) • PBS-Glicerol ◦ PBS ( 1ml ) , Glicero ( 7ml ) Obtencion de muestras para estudio Sangre periferica: Venipuntura • Extraer con jeringa ( Heparina concentracion 10 U.I x ml ) • Agitacion len...