Fundamentos y métodos clásicos de secuenciación (Maxam-Gilbert y Sanger)

Apuntes

UD 7-SECUENCIACIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS CONCEPTO Y APLICACIONES  La secuenciación es el proceso que nos permite determinar la secuencia de bases nitrogenadas de ADN o ARN, incluyendo su polaridad  La secuencia de un ácido nucleico nos permite obtener mucha información sobre sus propiedades funcionales y estructurales  La secuenciación permite comparar dos muestras, estudiar las variaciones y relaciones de parentesco, así como comprender mejor los mecanismos de evolución molecular  Por convenio, se va indica siempre la cadena 5’-3’ (en ADN bicatenario la otra cadena será la complementaria y antiparalela) SECUENCIACIÓN DE ADN  La secuenciación del ADN ha evolucionado hasta alcanzar técnicas altamente automatizadas y con tratamiento bioinformático de datos  Los primeros métodos se basaban en reacciones químicas y métodos enzimáticos que eran llevados a cabo manualmente  Los métodos automáticos de secuenciación los dividimos en tres generaciones  Primera generación- Basados en métodos de terminación de cadena y en técnicas de PCR. Más lento y menos económico para grandes moléculas  Segunda generación- Permiten la secuenciación en de un gran número de secuencias (secuenciación m...