ADN recombinante y herramientas de clonación: vectores, enzimas y PCR

Apuntes

BIOCEL P3 MANIPULACIÓN DE GENES ADN RECOMBINANTE ● Vector: es el que permite acarrear al ADN de interés, es como una cajita que lo guarda o incorpora. Es un ADN circular de doble hebra ( este tipo de ADN también está en la mit y bacterias) ○ Molécula capaz de replicarse de forma independiente en una célula huésped Una copia de ARN usa cebador, ARN polimerasa, secuencia de ADN, pero en esta, no se necesitan enzimas porque su función se reemplaza por calor u otros medios del lab que hacen lo mismo. ● Enzimas de restricción: cortan el vector y el gen de interés para que después mediante ligasas, el vector se incorpore y el ADN de interés quede dentro del vector. Esto origina ADN recombinante ○ Fue el primer paso en el desarrollo de la tecnología del ADN recombinante ○ Son enzimas endonucleasas ○ Cortan secuencias específicas ○ De 4-6 nucleótidos ○ Palindrómicas ○ Se obtienen de bacterias ■ Son proteínas que no tenemos como humanos, la tienen las bacterias que les sirven como un sistema inmune: reconocen secuencias de ADN del fago (virus de bacterias) y cortan esas secuencias específicas para evitar que se estén reproduciendo. ○ Cómo cortan: de forma escalonada o romo (línea roja) y qu...