EXTRACCI1N DE ADN 2 BIOLOG3A CELULAR Y MOLECULAR

Apuntes

EXTRACCIÓN DE ADN – BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR ✅ IMPORTANCIA Es la base de la biotecnología moderna. Permite técnicas como: PCR RFLP Diagnóstico molecular OGM (Organismos Genéticamente Modificados) Análisis filogenéticos Se utiliza para: Identificación de patógenos Mutaciones genéticas 🔄 TIPOS DE EXTRACCIÓN 1. Método Tradicional Varias etapas. Métodos: Fenol-cloroformo (fase acuosa contiene ADN) Salting-out (precipitación de proteínas con sales) Columnas de centrifugación 2. Kit Comercial Rápido y menos etapas. Uso de spin columns con membranas de sílice. Alta eficiencia y limpieza. 🔎 No existe un único mejor método. Depende de: Tipo de muestra Estado de conservación Técnica molecular posterior Recursos y tiempo 🧪 ETAPAS GENERALES Método Convencional: Lisis celular Separación de proteínas/lípidos Precipitación/Disolución del ADN Purificación Kit Comercial: Lisis celular Unión a matriz (sílice) Lavado Elución del ADN 🧬 CUANTIFICACIÓN Y CALIDAD DEL ADN Cantidad por célula: Célula diploide: 6 pg Espermatozoide: 3 pg Leucocitos: 30-60 ng/mL PCR necesita solo 1 ng Evaluación de calidad: Electroforesis en gel Calidad: desde ADN HMW (alta calida...