Bloque único: Componentes de soporte, PCR y detección de mutaciones en GALT

Apuntes

• Subtema: Componentes del soporte sólido en electroforesis En una electroforesis en gel de agarosa de ácidos nucleicos, ¿cuáles son los componentes del soporte sólido de la electroforesis? Los componentes son agarosa, buffer y algún componente de ácidos nucleicos. En una mezcla de PCR con un volumen final de 15 µl, ¿qué volumen colocarías de buffer y MgCl₂? Debes realizar los cálculos. La galactosemia es un error innato del metabolismo causado por múltiples mutaciones del gen GALT. Una de ellas es la mutación p.Asp98Asn. ¿Qué cambio produce esta mutación en las proteínas? Especifique el cambio de codón e indique el tipo de mutación y su nomenclatura a nivel del ADN. Esta mutación causa el cambio de Asp por Asn en el codón 98: GAU > AAU. Es una transición C.229 G>A. Si queremos diseñar la metodología para amplificar por PCR la región afectada por la mutación p.Asp98Asn del gen GALT, ¿qué software de base de datos podríamos utilizar? Podemos utilizar la base de datos del NCBI, los software Primer3 Plus y PCR in silico. • Subtema: Detección de mutación mediante técnica molecular La mutación p.Asp98Asn crea una nueva diana de restricción. ¿Qué técnica molecular sería adecuada para det...