TEMA 11 EXTRACCI2N DE ADN

Apuntes

TEMA 1: EXTRACCIÓN DE ADN ✅ Importancia Es la base para PCR, diagnóstico molecular, OGM, estudios filogenéticos Permite aislar ADN de células para análisis posteriores 🔄 Tipos de Extracción Tradicional: más laboriosa, puede usar: Fenol-cloroformo Salting-out Kit comercial: rápido y eficaz, usa spin columns (sílice) Elección del método depende de: tipo de muestra, técnica usada, tiempo y recursos 🧪 Etapas generales Lisis celular Separación de lípidos/proteínas Precipitación del ADN Purificación y Elución ⚙️ Evaluación Cuantificación por espectrofotometría Calidad por electroforesis Necesario: ≥1 ng para PCR 🤖 Automatización Ej.: MagNA Pure 96 → 96 muestras a la vez 🔑 Palabras clave: Lisis, Fenol-cloroformo, Spin column, Elución, Proteinasa K, Salting-out 🔬 TEMA 2: PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa) ✅ ¿Qué es? Técnica para amplificar fragmentos específicos de ADN (millones de copias) Alta especificidad (gracias a primers) y sensibilidad Inventada por Kary Mullis en los 80s 🔧 Componentes del Master Mix Agua ultrapura Buffer PCR MgCl₂ (cofactor) dNTPs (nucleótidos) Primers (delimitan la región) Taq polimerasa (enzima termoestable) ADN molde 🔁 Eta...