Laboratorio 02 - Solemne 02

Apuntes

•Fundamento ELISA y su aplicación en detección de autoanticuerpos ELISA es una técnica que permite detectar y cuantificar antígenos en muestras biológicas mediante espectrofotometría. Consiste en que un anticuerpo o antígeno específico está marcado con una enzima que cataliza una reacción que genera un cambio colorimétrico proporcional a la cantidad de analito presente. La amplificación de la señal se logra mediante la actividad enzimática sobre un sustrato y en la reacción inmunológica entre antígeno y anticuerpo. El ensayo ELISA Anti-ENA PoolPlus tiene como objetivo cuantificar autoanticuerpos contra antígenos nucleares extracíbles (ENA). •Reactivos y componentes del ensayo Los reactivos incluyen pocillos recubiertos con Ag’s específicos (nRNP/Sm, Sm, SS-A, SS-B, Scl-70 y Jo-1), calibrador de IgG humana de color rojo oscuro, controles positivo (color azul) y negativo (color verde), y conjugado enzimático anti-IgG humana conjugado con peroxidasa. El medio donde se realiza es heterogéneo, requiriendo lavados para separar inmunocomplejos de moléculas libres. Se emplea peroxidasa de rábano como marcador enzimático, que genera una señal de color medible. •Procedimiento y preparaci...