151VÉRITAS

Apuntes

• Vértices y objetivos del estudio Se logró purificar y caracterizar bioquímicamente una fosfolipasa A2 y una homóloga K49 a partir del veneno total de Bothrops barnetti de origen peruano. La purificación se realizó mediante cromatografía de interacción hidrofóbica, obteniendo nueve fracciones denominadas del 1 al 9. La fracción 5 fue identificada como una fosfolipasa A2 mediante medición de su actividad enzimática con un sustrato cromogénico específico, 4-nitro-3 (octanoiloxi) ácido benzoico, a pH 7.9. Además, se caracterizó estructuralmente una fosfolipasa A2 homóloga K49, que carece de actividad catalítica. • Metodología y análisis proteómico La electroforesis bidimensional (2D) reveló cinco fracciones, P101 a P105, con masa aproximada de 14 kDa y pI entre 7.6 y 8.5, indicando la presencia de fosfolipasas A2 y/o homólogas K49 en el veneno, desde una perspectiva proteómica. La secuenciación de aminoácidos, mediante espectrometría de masas ESI-MS/MS, permitió identificar dos toxinas: una fosfolipasa A2 y una homóloga K49. Los estudios de homología secuencial, realizados con bases de datos como MASCOT y Swiss-Prot, confirmaron la identidad de estas proteínas. • Estudios f...