Etapas en la extracci1n de ADN

Apuntes

Etapas en la extracción de ADN Los pasos necesarios para una correcta extracción y purificación del ADN mediante un procedimiento químico son: • 1 . Lisis de las células o virus . Las sales caotrópicas ayudan a romper la estructura tridimensional de macromoléculas como las proteínas o los ácidos nucleicos consiguiendo su desnaturalización . . 2. La adición de un detergente como el dodecilsulfato sódico ( SDS o NaDS) es necesaria a menudo para eliminar las membranas. Cuando el detergente entra en contacto con la célula, captura los lípidos y las proteínas • . 2 . Degradación de la fracción proteica asociada al ADN . Se consigue mediante la adición de una proteasa . La fracción proteica puede precipitarse mejor con la ayuda de sales como el acetato de amonio o el acetato sódico. 3. Purificación . Consta de 3 fases: ▪ Precipitación del ADN . El ADN es insoluble en alcohol, por lo que se puede precipitar con etanol frío o isopropanol y recuperar mediante una centrifugación. El alcohol del sobrenadante se llevará las sales añadidas previamente ▪ Lavado del pellet . Se realiza con alcohol frío volviendo a centrifugarse ▪ Recuperación . El sedimento se puede...